小鼠抗双链DNA抗体;天然DNA抗体（dsDNA-Ab）ELISA检测试剂盒（定量）-ELISA检测试剂盒-大小鼠-植物-人-进口ELISA试剂盒-酶免检测试剂盒-上海仁捷生物科技有限公司

简介：抗双链 DNA 抗体；天然 DNA 抗体(dsDNA-Ab）是一组抗核抗体（ANA），其目标抗原是双链 DNA。它们对系统性红斑狼疮（SLE）有很强的诊断性，并与狼疮肾炎的发病机制有关。其生成源于免疫系统对自身 DNA的错误识别，导致抗体与dsDNA结合，形成免疫复合物，进而引发炎症反应和组织损伤。dsDNA-Ab是SLE的特异性血清学标志物，其水平与疾病活动度密切相关，尤其在狼疮性肾炎等严重并发症中具有重要诊断价值。通过动态检测dsDNA-Ab水平，可评估治疗效果、预测疾病复发风险，并指导个体化治疗。

实验原理： 本试剂盒采用间接法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有双链DNA；天然DNA抗原的微孔中，依次加入样本、标准品、HRP标记的二抗，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠抗双链DNA抗体;天然DNA抗体(dsDNA-Ab)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。

灵敏度：0.193ng/mL

特异性：可检测样本中小鼠的dsDNA-Ab，且与其类似物无明显交叉反应。

样本稀释方案：

请提前预估样本的浓度范围，如果您的检测样本需要稀释，参考稀释方案如下：

稀释100倍：一步稀释。取5μL样本到495μL通用稀释液内，做100倍稀释；

稀释1000倍：两步稀释。取5μL样本到95μL通用稀释液内，做20倍稀释，再取5μL20倍稀释样本到245μL通用稀释液内，做50倍稀释，总共稀释 1000 倍；

稀释100000 倍：三步稀释。取5μL样本到195μL通用稀释液内，做40倍稀释，再取5μL40倍稀释样本到245μL通用稀释液内，做50倍稀释，最后取5 μL 2000 倍稀释样本到245μL通用稀释液内，做50倍稀释，总共稀释100000 倍；每步稀释时取液量不少于3μL，稀释倍数不超过100倍。每步稀释都需混合均匀，避免起泡。

实验所需自备试验器材：

1. 酶标仪（450nm）

2. 高精度移液器及吸头：0.5-10μL、5-50μL、20-200μL、200-1000μL

3. 37℃恒温箱

4. 蒸馏水或去离子水

检测前准备工作：

1. 请提前 10 分钟从冰箱中取出试剂盒，平衡至室温。

2. 标准品梯度工作液配制：加入 1mL 通用稀释液至冻干标准品中，静置15 分钟待其完全溶解后轻轻混匀(浓度为25ng/mL)，然后按照以下浓度： 25ng/mL、12.5ng/mL、6.25ng/mL、3.12ng/mL、1.56ng/mL、0.78ng/mL、 0.39ng/mL、0ng/mL进行稀释。倍比稀释方法：取7支EP管，每管中加入500μL通用稀释液,25ng/mL 的标准品工作液中吸取500μL到第一支EP管中混匀配成12.5ng/mL 的标准品工作液，按此步骤往后依次吸取混匀。最后一管直接作为空白孔，不需要再从倒数第二管中吸取液体，

3. HRP-二抗工作液配制：使用前15分钟将100×浓缩HRP-二抗于1000×g 离心1分钟，以通用稀释液将100×浓缩HRP-二抗稀释成1×工作浓度(例： 10μL浓缩液+990μL通用稀释液)，现配现用。

4. 1×洗涤液配制：取10mL 20×洗涤液到190mL蒸馏水中（从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶，属于正常现象，可放置室温，待结晶完全溶解后再配制)